EXCELENTE!! la incubación se realiza a 37°C, demoran entre 2-4 días en desarrollar y se realiza el cultivo por duplicado en anaerobiosis (donde veremos desarrollo) y en el sistema de lata cerrada con vela ("aerobiosis") en donde solo podrian desarrollar los anaerobios facultativos y anaerobios aerotolerantes. La llama de la vela consume parte del oxigeno presente en la atmósfera y produce dióxido de carbono. De esta manera comprobaremos que nuestro aislamiento es anaerobio estricto al observar solo desarrollo en anaerobiosis utilizando jarra de anaerobios (con mezcla de gases o Gas Pack) o cámara de anaerobiosis y NO en el sistema con la vela.

NOTA: Se puede hacer el cultivo primero en anaerobiosis y luego comprobar si desarrolla en "aerobiosis", o en caso de hacerlo de manera simultanea y que el desarrollo no fuera en pureza, se debe realizar REA de cada colonia obtenida en anaerobiosis, y si hubo algún desarrollo en el sistema de la vela hay que comprobar de manera individual que la colonia desarrolla solo en anaerobiosis. De esta manera seleccionaríamos la bacteria que solo desarrolla en anaerobiosis.